日韩av无码中文无码电影丨日韩人妻一区二区三区蜜桃视频丨久久人人爽人人爽人人片av高请丨牛牛视频一区二区三区丨av色综合久久天堂av色综合在

18611095289

article

技術文章

當前位置:首頁技術文章如何選擇同型對照?

如何選擇同型對照?

更新時間:2015-04-15點擊次數:2889

同型對照的主要目的是確定一抗的結合是特異性的,而不是非特異性的Fc受體或與其他蛋白的相互作用。還可以用來競爭性的結合抗體,與功能阻斷抗體發揮同樣的功能。 同型對照要與一抗的來源,Ig分型和標記*一致。 

同型對照(Isotype Control):使用與一抗相同種屬來源、相同亞型、相同劑量和相同的免疫球蛋白及亞型的免疫球蛋白,用于消除由于抗體非特異性結合到細胞表面而產生的背景染色。如果一抗是多抗,可以用與一抗相同的正常血清。同型對照為免疫熒光標記中的陰性對照。由于熒光標記單抗的組來源不同,應選用相同來源的未標記單抗作為同型對照來調整背景染色。舉個例子:比如檢測一抗為單抗的mouse anti rat CD11b,clone OX-42 purified IgG,那么它的isotype 是mouse IgG2a, 所以可以用純化的 mouse IgG2a來做OX-42的同型對照(Isotype Control)。此外,同型對照與單克隆抗體(MoAb)所標記的熒光色素、濃度、F:P比值(標記的熒光色素與免疫球蛋白分子的比值)應該相同為*,這對準確設定陰性與陽性細胞的界標有重要意義,切忌使用與MoAb不相 匹配的同型對照,為同一實驗室、采用相同工藝或方法制備(如同一品牌)的產品。

如何選擇同型對照 ?

(1)一般選擇與一抗的成分*相同種屬來源、相同亞型和亞鏈、相同熒光標記的抗體,比如抗人的CD56 FITC標記的抗體,成份是Mouse IgG1,κ。那么它的同型對照應該是FITC標記的Mouse IgG1,κ。注意同型對照的成份跟它的名稱是相同的. 

(2)如果是抗體的組合形式是純化的一抗+熒光標記的二抗,那么應該選擇一抗的同型對照。比如CD86的純化抗體,成分是Mouse IgG1,κ。它的同型對照是純化的Mouse IgG1,κ。它的二抗PE標記的抗小鼠IgG1,。那么染色方式如下:樣本管:純化的CD86+PE標記的抗Mouse IgG1(二抗)+樣本,同型對照管:純化的同型對照+PE標記的抗Mouse IgG1(二抗 )+樣本. 

(3)如果沒有找到適合的同型對照,在保持來源相同、熒光標記相同、免疫球蛋白類別相同條件下,那么優先選擇的順序應該是亞鏈不同--亞型不同--相同類別。比如,某種的抗體的來源是Mouse IgG2b,κ。如果在同型對照表里面找不到*相同的同型對照,那么優先選擇相同熒光標記Mouse IgG2a為同型對照。如果也沒有找到Mouse IgG2a,那么優先選擇相同熒光標記的Mouse IgG2b作為同型對照。如果zui后還是沒有找到Mouse IgG2b,那么選者相同熒光標記的Mouse IgG2作為同型對照。


服務熱線
18611095289

掃碼加微信

主站蜘蛛池模板: 日本在线看片免费人成视频1000| 成 人 色 网 站免费观看 | 欧美日韩亚洲综合| 中文字幕色av一区二区三区| 欧美国产精品一二三| 麻豆一区二区99久久久久| 精品自拍第一页| 老太婆性杂交欧美肥老太| 男人靠女人免费视频网站| 天天爽夜夜爽人人爽一区二区| 中文在线www天堂网| 欧美精品中文字幕亚洲专区| 又大又硬又黄的免费视频| 亚洲天堂男| 无码性午夜视频在线观看| 国产亚洲一卡2卡3卡4卡老狼| 天天鲁一鲁摸一摸爽一爽| 懂色av蜜臀av粉嫩av喷吹| 精品国产一区二区三区免费| 青青草99久久精品国产综合| 波多野结衣av无码| 精品福利一区| 亚洲人成网站在线播放942| 色偷偷亚洲| 青青草视频免费观看| 国产视频www| 日韩a无v码在线播放| 亚洲深夜福利视频| 国产在线不卡一区二区三区| 免费视频欧美无人区码| 国产tv在线观看| 成人性做爰aaa片免费看| 久久久网址| 亚洲a∨国产av综合av下载| 又大又硬又黄又刺激的免费视频| 18禁裸乳无遮挡自慰免费动漫| 一本一本久久aa综合精品| 久久在线免费视频|