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實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型(EAE模型)方案

更新時間:2024-08-05點擊次數:2593

實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型(EAE模型)

背景簡介:

多發性硬化癥(Multiple Sclerosis,MS)是一種發生于中樞神經系統的炎癥性脫髓鞘疾病。實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)是研究該疾病的基本模型。EAE模型實驗動物通過神經組織(其中的某些成分)或病毒誘導產生的。EAE的誘導有主動誘導法和被動誘導法兩種。不同的免疫方法,可影響抗原遞呈,激發不同的免疫反應,這不但影響EAE的發生率,還可影響其發展與轉歸。通常采用主動誘導法制備EAE模型,將抗原與佐劑的混合乳劑直接注射至動物體內,經過一定時間的潛伏期,誘導EAE的產生。抗原注射部位的不同,可影響EAE的發生率、潛伏期、死亡率及復發率。常用的注射部位有腳墊、頸部及背部(皮下、皮內、肌肉)、腹腔和尾靜脈等多種,其中以皮下多點注射及腳墊注射的發病率最高,而頸部注射則有較高的復發率。 因多次注射易引發免疫耐受,現在多采用單次注射抗原法。EAE的被動轉移實驗是研究其發病機制的最直接證據,也是研究EAE的治療及預防措施的良好模型。

操作流程:

小鼠品系:雌性C57BL/6 小鼠

周齡:6-8

0天:等體積混合MOG35-55(200ug)和CFA佐劑(CFA0.5mg)配成乳劑 ,皮下注射100ul/只。

3:腹腔注射200ng 無菌PBS溶解的百日咳毒素,100ul/只。

典型的EAE發病時間為免疫后9-14天,免疫后3-5天為高峰期,隨后逐漸恢復。高峰期持續1-3天。有25%概率的小鼠在免疫恢復后,疾病復發,嚴重程度增加,通常發生在免疫后的20-27天。小鼠通常觀察4周左右,在此期間,小鼠將保持慢性癱瘓。

此方案源于文獻(PMID: 20811645),具體的免疫劑量我們建議客戶根據您的實驗需求制定和優化實驗方案。以上方案僅供參考。

EAE的神經癥狀通常根據Kono等提出的標準分為5級。0級:無任何臨床癥狀;1級:動物尾巴無力,2級:尾部無力+肢體無力,3級:肢體輕度麻痹,4級:肢體嚴重麻痹,被動翻身后不能復原;5級:瀕死狀態或死亡。

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品牌

貨號

英文名稱

規格

Hooke Labs

DS-0111

Rat/Mouse Mog35-55

2mg/ml1ml

4ADI

MOG3555-P

MOG35-55

1mg/5mg/10mg

List   Labs

180

Pertussis Toxin, Lyophilized in buffer

50ug

List   Labs

181

Pertussis Toxin Salt-Free

50ug

List   Labs

179A

Pertussis Toxin (in glycerol)

50ug

Sigma

P7208

Pertussis   Toxin, Lyophilized in buffer

50ug


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